Что такое пцр вирус герпеса

анализ на герпес методом ПЦР

Human alphaherpesvirus под кодовым названием HSV (в переводе с латинского вирус простого герпеса) относится к ДНК-содержащим вирусам.

HSV — большая семья из более чем 100 видов ДНК-вирусов, которые паразитируют на животных и людях, но только 8 из них вызывают заболевания у людей.

Наиболее распространенными являются вирус 1,2 и 6 типа.

Это самые загадочные и коварные вирусы, способные длительное время протекать в латентной форме, рецидивировать и заражать здоровых людей.

Поэтому диагностика герпеса остается актуальным вопросом.

Важно не только выявить герпетическое заболевание, но и его тип, что позволит подобрать наиболее эффективную тактику лечения и профилактики рецидивов.

Наиболее точным и информативным методом выявления герпесной инфекции остается ПЦР-анализ (полимеразная цепная реакция).

1 и 2 тип герпеса: ПЦР-исследование

Диагностические возможности, которые позволяют распознавать атипичные и бессимптомные клинические инфекции ВПГ, заключаются в применении полимеразной цепной реакции.

ПЦР признан наиболее точным и результативным методом в выявлении вирусов герпеса.

Получение микробиологических результатов ПЦР крови на герпес в короткие сроки возможно благодаря методам молекулярной биологии, основанным на обнаружении бактериальной ДНК.

Полимеразная реакция более чувствительна, чем стандартные методы, используемые в микробиологической диагностике, поэтому часто рекомендуется для выявления вирусов.

Реакция ПЦР включает в себя амплификацию выбранного фрагмента ДНК с использованием специфических праймеров.

Это позволяет обнаружить присутствие даже минимального количества вирусного ДНК.

Количественные методы ПЦР в реальном времени (RT-PCR) являются важным дополнением к качественным методам выявления инфекций герпетического характера.

Благодаря высокой достоверности результатов, глубокой автоматизации и низкой трудоемкости,

Методы молекулярной биологии, такие как ПЦР, успешно используются для выявления широкого спектра микроорганизмов, включая вирусы, бактерии, грибы и простейшие.

В отличие от методов разведения, они не требуют обнаружения роста микробов.

Молекулярные методы находят особое применение в диагностике патогенных микроорганизмов, которые трудно или невозможно выращивать in vitro.

ПЦР позволяет значительно сократить время ожидания результата и отличается высокой чувствительностью и специфичностью.

Особую актуальность ПЦР-анализ имеет при диагностике инфекции у беременной женщины.

ВПГ вызывают генитальные инфекции у беременных женщин и могут передаваться от инфицированных матерей к плоду и новорожденным.

У ребенка ВПГ может спровоцировать заболевания кожи, глаз, рта и центральной нервной системы.

Так, было установлено, что ВПГ-2 является причиной 15-30% инфекций плода и новорожденных.

Инфекции, вызванные герпесвирусами человека из-за их повсеместного распространения, представляют собой серьезную проблему для здоровья.

Социально-экономические проблемы и их последствия повлияли на динамику распространения инфекции, появление нового пути передачи и клинических симптомов.

Наиболее популярной клинической особенностью инфекции вируса простого герпеса типа 1 (ВПГ-1) является оролабиальная инфекция.

Но наиболее важной проблемой является генитальный герпес (ВПГ-2).

Из-за таких осложнений, как заражение другими заболеваниями, передаваемыми половым путем, инфекция плода (герпес новорожденных).

Почему герпетическая инфекция является настолько распространенной и легко передаваемой?

Многие инфицированные герпесом люди страдают от бессимптомной болезни, но периодически выделяют вирус в слюну или генитальные выделения.

У некоторых приобретение первичного генитального герпеса может вызывать болезненные язвенные поражения и системные проявления.

Включая головную боль, недомогание и лихорадку продолжительностью до 3 недель.

После начальной половой инфекции ВПГ становится латентным в крестцово-нервных ганглиях и может активизироваться, вызывая периодические поражения половых органов.

Хотя рецидивирующие эпизоды короче и более локализованы, чем первые, хроническая природа этого заболевания и возникновение рецидивов могут приводить к серьезным осложнениям.

Передача вируса возможна во время симптоматической инфекции у полового партнера, но большинство заражений происходит во время бессимптомного эпизода.

Как проводится диагностика ПЦР 1 и 2 типа герпеса

Исследуемым материалом является венозная кровь, также для диагностики герпеса методом ПЦР берется урогенитальный мазок.

У мужчин забор материала проводится специальным инструментом со стенок мочеиспускательного канала, у женщин со слизистой влагалища и шейки матки.

Перед проведением ПЦР на герпес 1 и 2 типа рекомендуется придерживаться некоторых правил, что позволит получить максимально точные результаты.

Женщинам за несколько дней нужно исключить половые контакты, использование вагинальных свечей и спринцеваний.

За 2-3 часа исключить мочеиспускание.

Мужчинам также рекомендуется не мочиться за несколько часов до анализа.

Интерпретировать результаты можно следующим образом:

Положительный ПЦР герпес — ДНК возбудителя присутствует.
Отрицательный герпес ПЦР — ДНК возбудителя отсутствует.

ПЦР на герпес 6 типа

Герпесвирус человека 6 (HHV-6) представляет собой набор из двух близкородственных вирусов герпеса, известных как HHV-6A и HHV-6B.

HHV-6B инфицирует почти 95% людей, как правило, в возрасте до трех лет и зачастую проявляется сыпью — розовой эритемой, известной как розеола.

Относительно HHV-6A, то мало что известно о распространенности вируса или о том, как он приобретается.

Но одно небольшое исследование выявило очень низкие уровни 6А у половины исследуемых здоровых людей.

Главные пути инфицирования — передача через слюну и воздушно-капельным путем.

Как и другие герпесвирусы, HHV-6 устанавливает латентность в течение всей жизни и может реактивироваться на фоне благоприятных факторов, зачастую — это снижение иммунитета.

У взрослых инфекция HHV-6 обычно возникает в форме лимфаденопатии, иногда в тяжелой форме, сопровождающейся лихорадкой и нарушением функции печени.

После заражения вирус остается бездействующим в слюнных железах и мононуклеарных клетках периферической крови, но может быть реактивирован в условиях иммуносупрессии хозяина.

Герпесвирус человека 6 типа диагностируется с помощью полимеразной реакции, биологическим материалом являются:

Венозная кровь
Спинномозговая жидкость
Слюна
Урогенитальный мазок/соскоб (шейка матки, влагалище)
Соскоб мочеиспускательного канала
Эндометриозный биоптат

Кроме того, материалом для анализа ПЦР на герпес является соскоб с поверхности половых органов.

Как подготовиться к анализам на герпес

Точность результата также зависит от подготовки пациента к анализу.

Для исключения получения ложноположительного или ложноотрицательного результата необходимо проводить забор биологического материала на голодный желудок.

Последний прием пищи должен быть за 8-10 часов до посещения врача.

Также за сутки следует исключить любые местные процедуры.

Это спринцевания, использование влагалищных суппозиториев, инстилляции уретры, антисептическую обработку горла, полости рта и др.

Основными показаниями к назначению диагностики шестого типа герпеса являются:

Высыпания на коже, появившиеся после короткого периода лихорадки.
Увеличение лимфатических узлов в области шеи и ушей.
Признаки герпетиформного дерматита.
Как дифференциальный анализ инфекционно-воспалительных патологий кожных покров.
В качестве скрининговых тестов при иммунодефицитном состоянии у пациента.

Вирусы герпеса, включая HHV-6, HHV-7 и HHV-8, могут вызывать внутриутробные инфекции у плода в перинатальном периоде и вызывать заболевания у новорожденных.

HHV-6 может встраивать свою ДНК в геном матери и, таким образом, вызывать врожденные инфекции, которые встречаются примерно у 1% детей, но протекают бессимптомно.

герпес и инфекции плода Поэтому своевременная диагностика и лечение герпеса является важным этапом планирования беременности.

ПЦР-диагностика Herpes zoster

Опоясывающий лишай или герпес зостер является вирусным заболеванием и встречается только у людей, у которых ранее была ветряная оспа.

Этиологическим фактором является Human herpesvirus 3 типа.

После того, как инфекция ликвидирована, вирус не выводится из организма пациента, а остается в состоянии покоя в нервных клетках.

В ситуации значительного снижения иммунитета вирус реактивируется и развивается опоясывающий лишай со своими характерными симптомами.

Появляется зудящая сыпь, идентичная оспе, а также папулы, везикулы, заполненные серозным содержимым.

ПЦР на присутствие герпес зостер состоит в обнаружении ДНК Human herpesvirus 3 в различных типах материала, взятого у пациента.

Материалом для исследования могут служить: цельная кровь, плазма, сыворотка, спинномозговая жидкость, урогенитальный мазок.

Особую ценность анализ представляет для женщин, планирующих беременность или уже ожидающих ребенка.

При первичном заражении вирусом в период беременности существует огромный риск спонтанного прерывания беременности (на ранних сроках) и развития внутриутробных патологий плода.

Контрольный ПЦР анализ на герпес после лечения

После прохождения курса терапии противовирусными препаратами, проводится повторная сдача анализа с целью мониторинга эффективности лечения.

Повторный ПЦР назначается спустя 14-20 дней после завершения терапевтического курса.

Результаты диагностики могут быть предоставлены в двух вариантах.

Пациент может получить положительный либо отрицательный вариант анализа.

В первом случае будет идти речь о наличии следов инфекции в организме человека на данный момент.

Здесь можно сделать вывод, что медикаментозное лечение было проведено некорректно или требуется повторный курс приема препаратов.

Отрицательный результат говорит об успешном лечении и отсутствии следов инфекции в организме.

ИФА или ПЦР на герпес: какой анализ лучше?

Для того чтобы понять, какой анализ лучше будет для выявления герпетической инфекции, следует понимать специфику работы данных лабораторных методов.

ИФА — иммуноферментный анализ, представляет собой широко используемый лабораторный метод, который назначается для количественного определения антител в крови.

ELISA (ИФА) основана на обнаружении в биологическом материале иммунных белков — антител, которые возникают при ответных реакциях против антигенов герпетической инфекции.

Антитела тестируются в двух классах, IgM и IgG. IgM — это первые элементы, которые появляются в организме после контакта с герпетической инфекцией и со временем могут исчезать.

Интерпретировать результаты анализа поможет врач, обычно в заключении можно видеть такие сведения:

Наличие иммуноглобулинов М (IgM). Выполняет функцию самого раннего иммуноглобулина, вырабатываемого в ходе иммунного ответа. При наличии IgM в организме отмечается острый инфекционный процесс. А его отсутствие может быть признаком как хронической инфекции герпеса, так не выявленного патогена.
Наличие иммуноглобулина A (IgA). В сыворотке крови он составляет около 15% всех иммуноглобулинов. Он синтезируется плазматическими клетками, лежащими в основе эпителия. Является маркером оценки состояния иммунной системы местного типа.
Наличие иммуноглобулин G (IgG). Представляет собой гликопротеин, продуцируемый В-лимфоцитами или плазматическими клетками после контакта с антигеном. IgG — антитела, которые действуют главным образом против вирусов и бактерий. Присутствие IgG в биологическом материале будет говорить о выздоровление или перехода инфекционного процесса в хроническую форму.

В ряде случаев можно получить и другие результаты, такие как:

Ложноположительные результаты являются результатом перекрестной реактивности большинства антител IgM с другими белками.
Ложноотрицательные результаты могут появиться на ранних стадиях инфекции, после чего тест следует повторить примерно через 3-4 недели. Это называется серологическое окно, которое является начальным периодом инфекции, при котором организм еще не «выработал» специфические антитела.

ПЦР — молекулярная диагностика с использованием метода полимеразной цепной реакции, включает дублирование определенного фрагмента генетического материала (ДНК или РНК).

Таким образом, можно выявить конкретный тип возбудителя.

Эта методика позволяет с высокой чувствительностью и точностью подтвердить или исключить присутствие патогенных возбудителей в тестируемом образце.

Это особенно важно в диагностике микроорганизмов, где традиционные методы исследований не показывают нужную информативность, как в случае вирусных заболеваний.

Диагностическая чувствительность теста при диагностике герпесной инфекции составляет более 95% на момент появления клинических симптомов.

При диагностике неонатальных патологий тест показывает диагностическую чувствительность 85-100% и специфичность 70-99%.

Какой именно анализ выбрать для диагностики герпеса подскажет лечащий врач.

Как правило, ПЦР назначается непосредственно для обнаружения патогенного микроорганизма, а ИФА в качестве мониторинга эффективности лечения.

После прохождения терапии по рекомендации доктора могут быть назначены оба варианта тестирования.

Когда и как лечить герпес, если ПЦР положительный?

При положительных результатах ПЦР лечение назначается даже при отсутствии выраженной клинической картины, особенно, если женщина планирует беременность.

Тактика лечения разрабатывается в зависимости от типа герпетической инфекции и осложнений, к которым привело заболевание.

Общая терапия заключается в назначение протиововирусных препаратов:

Ацикловир (Зовиракс)
Валацикловир (Валтрекс)
Фамцикловир (Фамвир)
Пенцикловир (Денавир)

Некоторые из этих препаратов выпускаются в форме таблеток для перорального использования.

Также существуют формы средств в виде крема для нанесения на язвы, герпетические раны.

В случае очень серьезных инфекций противовирусные препараты могут применяться путем инъекционного введения.

Для диагностики и лечения герпеса обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник

Вирус простого герпеса (ВПГ) – ДНК–содержащий вирус Herpes simplex virus семейства Herpesviridae подсемейства Alphaherpesvirinae. Согласно статистическим данным ВОЗ, инфекции, обусловленные ВПГ, занимают второе место по распространенности среди вирусных заболеваний человека. Различают два серотипа ВПГ – ВПГ-1 и ВПГ-2. Оба типа вируса вызывают инфекционные заболевания человека различной степени тяжести от характерных везикулезных или пустулезных высыпаний на коже и слизистых до поражений ЦНС. ВПГ-1 – причина офтальмогерпеса, протекающего в форме кератита или кератоиридоциклита, реже увеита, в единичных случаях — ретинита, блефароконъюнктивита. Заболевание может привести к помутнению роговицы и вторичной глаукоме. ВПГ-1 — основная причина энцефалита у взрослого населения стран умеренного климата, при этом только у 6–10% больных отмечается одновременное поражение кожи.

В ходе проведения эпидемиологических исследований установлено наличие специфических АТ к ВПГ у 90–95% обследуемых лиц среди взрослого населения, при этом первичная инфекция манифестно протекает лишь у 20–30% инфицированных.

Читайте также: Герпес на локте руки

ВПГ характеризуется коротким циклом репродукции в клеточных культурах и оказывает сильное цитопатическое действие. Он способен к репродукции в различных типах клеток, чаще персистирует в ЦНС, преимущественно в ганглиях, поддерживая латентную инфекцию с возможностью периодической реактивации. Наиболее часто вызывает кожно-слизистые формы заболевания, а также поражение ЦНС и глаз. Геном ВПГ может интегрироваться с генами других вирусов (включая ВИЧ), вызывая их активацию, также возможен его переход в активное состояние на фоне развития иных вирусных и бактериальных инфекций.

Пути передачи ВПГ: воздушно-капельный, половой, контактно-бытовой, вертикальный, парентеральный. Факторами передачи ВПГ служат кровь, слюна, моча, везикулярный и вагинальный секрет, сперма. Входными воротами являются поврежденные слизистые оболочки и кожа. По периферическим нервам вирус доходит до ганглиев, где сохраняется пожизненно. При активации ВПГ распространяется по нерву к первоначальному очагу поражения (механизм “замкнутого цикла” – циклическая миграция вируса между ганглием и поверхностью кожи). Может происходить лимфогенная и гематогенная диссеминация возбудителя, что особенно характерно для недоношенных новорожденных и лиц с выраженным иммунодефицитом (в т. ч. при ВИЧ-инфекции). ВПГ обнаруживается на лимфоцитах, эритроцитах, тромбоцитах, при проникновении вируса в ткани и органы возможно их повреждение вследствие его цитопатического действия. Сохраняющиеся в течение всей жизни у человека вируснейтрализующие АТ (даже в высоких титрах), хотя и препятствуют распространению инфекции, но не предупреждают рецидивов.

Выделение ВПГ продолжается значительное время при первичном инфицировании (ДНК выявляется в плазме крови в течение 4–6 недель), при рецидивах – не более 10 дней. Формирование противогерпетического иммунитета происходит как при манифестном, так и при бессимптомном течении инфекции. При первом контакте АГ с клетками иммунной системы в течение 14–28 дней формируется первичный иммунный ответ, который у иммунокомпетентных лиц проявляется образованием интерферонов, выработкой специфических АТ (вначале – IgM, впоследствии – IgA и IgG), повышением активности естественных киллеров – NK-клеток и формированием мощного пула высокоспециализированных киллеров. В случае реактивации или реинфекции возникает повторный контакт клеток иммунной системы с АГ, образуются АТ и Т-киллеры. Реактивация сопровождается продукцией АТ IgM (редко даже при наличии типичных высыпаний), АТ IgА (чаще) и IgG.

ВПГ (преимущественно ВПГ-2) вызывает генитальный герпес – хроническое рецидивирующее заболевание. Клинические проявления первичного эпизода инфекции, вызванной разными типами вируса сходны, однако инфекции, вызванной ВПГ-2, в гораздо большей степени свойственен рецидивирующий характер. Передача вируса происходит при половых контактах, очаг инфекции локализуется на слизистой и коже половых органов и перигенитальной зоны. Размножение вируса в клетках эпителия приводит к образованию очага сгруппированных пузырьков (папул, везикул), в которых содержатся вирусные частицы, сопровождается покраснением, зудом. Первичный эпизод протекает острее (обычно с симптомами интоксикации), чем последующие рецидивы. Часто возникают симптомы дизурии, признаки эрозии шейки матки.

На ранних стадиях ВИЧ-инфекции течение заболеваний, вызванных ВПГ-1 или ВПГ-2, короткое и типичное. Частым признаком углубления иммуносупрессии и перехода латентной стадии ВИЧ-инфекции в стадию вторичных заболеваний служит развитие опоясывающего лишая. Наличие стойких глубоких вирусных поражений кожи, повторный или диссеминированный опоясывающий лишай, локализованная саркома Капоши — одни из клинических критериев стадии вторичных заболеваний ВИЧ-инфекции. У больных с количеством CD4+-клеток менее 50 клеток/мкл отсутствует тенденция к самостоятельному заживлению эрозивно-язвенных дефектов. Частота герпетического энцефалита среди поражений ЦНС при ВИЧ-инфекции — около 1–3%. У больных СПИДом с наличием глубокого иммунодефицита заболевание нередко протекает атипично: болезнь начинается подостро и медленно прогрессирует до тяжелейших проявлений энцефалита.

Герпетическая инфекция даже при бессимптомном течении способна вызвать целый ряд патологий у беременной и новорожденного. Наибольшую угрозу репродуктивной функции представляет генитальный герпес, который в 80% случаев обусловлен ВПГ-2 и в 20% – ВПГ-1. Бессимптомное течение чаще имеет место у женщин и более типично для ВПГ-2, чем для ВПГ-1. Первичное инфицирование или рецидивы во время беременности наиболее опасны для плода, поскольку могут привести к самопроизвольному выкидышу, гибели плода, мертворождению, порокам развития. Заражение плода и новорожденного чаще отмечается при бессимптомном течении генитального герпеса, чем при клинически выраженном типичном течении. Новорожденный может приобрести герпетическую инфекцию внутриутробно, во время родов (в 75–80% случаев), либо постнатально.

ВПГ-2 может проникать в полость матки через цервикальный канал с поражением плода в 20–30% случаев; трансплацентарное инфицирование может происходить в 5–20% случаев, инфицирование во время родов – в 40% случаев. Возможна передача вируса при выполнении медицинских процедур. При типичных клинических проявлениях диагноз герпетической инфекции трудностей не представляет, тогда как при атипичных формах верифицируется на основании результатов лабораторных исследований, при этом приоритетными должны быть исследования, направленные на выявление маркеров текущей (активной) инфекции. Активация инфекционного процесса при герпетической инфекции, даже при наличии клинических проявлений в стадии обострения, редко сопровождается выработкой АТ-ВПГ IgM (чаще – при первичной инфекции либо реинфекции), как правило, при этом отмечают появление АТ-ВПГ IgА.

Целесообразными являются диагностические исследования для обнаружения ВПГ или его маркеров при наличии в анамнезе пациента указаний на рецидивирующую инфекцию либо на дебют герпетической инфекции в период беременности.

Дифференциальная диагностика. При наличии инфекционного синдрома (длительный субфебрилитет, лимфаденопатия, гепато- или гепатоспленомегалия) – токсоплазмоз, цитомегаловирусная инфекция и инфекция, вызванная ВЭБ; контактный дерматит, инфекционные заболевания, сопровождающиеся везикулезными высыпаниями на коже и слизистых оболочках (ветряная оспа, опоясывающий герпес, пиодермия и др.); эрозивно–язвенные поражения гениталий, обусловленные Treponema pallidum, Haemophilus ducreyi; болезнь Крона, синдром Бехчета, фиксированная токсикодермия, менингоэнцефалиты и менингиты неясной этиологии, увеиты и кератоконъюнктивиты неясной этиологии).

Показания к обследованию

Планирование беременности;
женщины, имеющие в анамнезе либо на момент обращения типичные герпетические высыпания любой локализации, в т. ч. рецидивирующий генитальный герпес, или наличие пузырьковых и/или эрозивных высыпаний на коже, ягодицах, бедрах, слизисто–гнойные выделения из влагалища;
наличие полового контакта с партнером, имеющим генитальный герпес;
атипичная форма заболевания: отсутствие зуда или жжения, отсутствие везикул, веррукозные узелки; обширные кожные поражения (до 10% случаев предполагаемого опоясывающего герпеса обусловлено не ВЗВ, а ВПГ);
женщины с отягощенным акушерским анамнезом (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
беременные женщины (в первую очередь имеющие УЗИ-признаки внутриутробной инфекции, лимфоденопатии, лихорадку, гепатит и гепатоспленомегалию неясного генеза);
дети с признаками внутриутробной инфекции, врожденными пороками развития или наличием на коже или слизистых оболочках везикул или корочек;
дети, рожденные от матерей, перенесших генитальный герпес во время беременности;
Пациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением глаз (увеит, кератит, ретинит, ретинальный некроз), поражением ЖКТ.

Материал для исследования

Содержимое пузырьков/везикул со слизистых оболочек и кожи половых органов мужчин и женщин – микроскопические исследования, культуральные исследования, выявление АГ, выявление ДНК;
мазки (соскобы) со слизистых оболочек цервикального канала, уретры (при отсутствии видимых пузырьковых высыпаний или эрозивно-язвенных поражений) – выявление ДНК;
сыворотка крови, СМЖ (по показаниям) – выявление АТ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопическое исследование, выделение и идентификация вируса в культуре клеток, выявление АГ или ДНК возбудителя, определение специфических АТ.

Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики (вирус простого герпеса – анализ). Среди методов лабораторной диагностики “золотым стандартом” долгое время считали выделение ВПГ в культуре клеток из крови, СМЖ, содержимого везикулезных или пустулезных высыпаний и других локусов (носоглотки, конъюнктивы, уретры, влагалища, цервикального канала). Данный метод предполагает изоляцию вируса при заражении биологическим материалом чувствительных культур клеток с его последующей идентификацией. К неоспоримым преимуществам метода относятся: возможность определения активности инфекции при наличии клинических проявлений и проведения типирования вируса, а также установления чувствительности к противовирусным препаратам. Однако длительность анализа (1–8 дней), трудоемкость, высокая стоимость и необходимость определенных условий проведения исследований затрудняет применение данного метода для рутинной лабораторной диагностики заболевания. Чувствительность достигает 70–80%, специфичность – 100%.

Материал с поверхности высыпаний может быть использован для микроскопических (окраска препаратов по Романовскому–Гимзе) или цитологических (окраска препаратов по Тцанку и Папаниколау) исследований. Названные процедуры имеют низкую диагностическую специфичность (не позволяют дифференцировать ВПГ от других герпес-вирусов) и чувствительность (не более 60%), поэтому не могут считаться надежными методами диагностики.

Выявление АГ ВПГ в крови, СМЖ, содержимом везикулезных или пустулезных высыпаний и других локусов (носоглотки, конъюнктивы, уретры, влагалища, цервикального канала) проводят методами РИФ и РНИФ с использованием моноклональных или высокоочищенных поликлональных АТ. При использовании метода ИФА чувствительность исследования возрастает до 95% и более, специфичность при манифестном герпесе варьирует от 62 до 100%. Однако большинство наборов реагентов для выявления антигена ВПГ методом ИФА не позволяют провести дифференцирование серотипов вируса.

Обнаружение ДНК ВПГ-1 и/или ВПГ-2 при использовании ПЦР в различном биологическом материале превосходит чувствительность обнаружения ВПГ при использовании вирусологического исследования. Выявление ВПГ в соскобах со слизистых оболочек полости рта, урогенитального тракта, в отделяемом пузырьковых высыпаний (везикул) и эрозивно–язвенных поражений кожи с помощью ПЦР является методом выбора. Несомненную ценность имеет определение количества ДНК ВПГ методом ПЦР в режиме реального времени, результаты исследования можно использовать как с диагностической целью, так и для оценки эффективности лечения.

Для выявления АТ к ВПГ разных классов IgА, IgG, IgM, суммарных к антигенам ВПГ обоих типов или типоспецифичных, применяют методы РНИФ или ИФА, для определения авидности АТ IgG – метод ИФА. Наибольшее диагностическое значение имеет детекция АТ IgM как показателя активности процесса, их выявление может свидетельствовать об остром заболевании, реинфекции, суперинфекции или реактивации. Однако в клинически выраженных случаях, в т. ч. при типичном течении генитального или неонатального герпеса, специфические АТ IgM выявляются редко (в 3–6% случаев). Определение авидности АТ-ВПГ IgG несет низкую информационную нагрузку: реактивация при клинически выраженных случаях сопровождалась наличием высокоавидных АТ. Тест на выявление АТ-ВПГ IgА является методом выбора наряду с определением ДНК либо АГ ВПГ при определении активности инфекционного процесса.

Показания к применению различных лабораторных исследований. Определение АТ целесообразно проводить для подтверждения первичной инфекции, а также установления диагноза у пациентов с бессимптомным и атипичным течением заболевания.

У беременных женщин (скрининг) целесообразно проведение исследований для выявления АТ-ВПГ IgМ, а также выявление АТ-ВПГ IgА. Для беременных высокого инфекционного риска дополнительно рекомендуется определение ДНК и АГ ВПГ в лейкоцитарной взвеси или в материале из предполагаемого очага.

При подозрении на внутриутробную инфекцию рекомендуется выявление ДНК вируса в пуповинной крови, у новорожденных – детекция ДНК вируса в различных биологических пробах (отделяемое пузырьковых высыпаний (везикул) эрозивно– язвенных поражений кожи и слизистых оболочек, ротоглотки, конъюнктивы; периферическая кровь, СМЖ, моча и др.), а также определение АТ-ВПГ IgМ и IgА в крови. Учитывая высокую диагностическую значимость определения ДНК вируса методом ПЦР и наличие зависимости между летальностью у новорожденных и виремией, вызванной ВПГ, некоторые исследователи рекомендуют использовать этот метод для лабораторного скрининга генерализованной герпетической инфекции детей, относящихся к группе высокого риска.

Выявление АГ-ВПГ в различных биологических пробах предлагается применять в качестве экспресс-тестов для дифференцирования типов вируса при скрининге популяций с высоким уровнем заболеваемости, а также при мониторинге заболевания.

У больных ВИЧ-инфекцией с атипичными клиническими проявлениями кожных поражений в диагностике отдается предпочтение выявлению ДНК ВПГ методом ПЦР как самому чувствительному методу лабораторной диагностики.

Особенности интерпретации результатов. Обнаружение вирусоспецифических АТ IgM может свидетельствовать о первичной инфекции, реже – о реактивации или реинфекции, выявление АТ-ВПГ IgА – об активности инфекционного процесса (затяжное течение при дебюте герпетической инфекции, реинфекции или реактивации). О врожденной инфекции (неонатальный герпес) свидетельствует присутствие АТ-ВПГ IgM и(или) IgА. Выявление АТ IgG отражает латентную инфекцию (инфицирование).

Выявление ДНК ВПГ свидетельствует о наличии активной (репликативной) стадии вирусной инфекции с учетом выраженности клинических проявлений. Выявление ДНК ВПГ-1 и/или ВПГ-2 методом ПЦР позволяет при однократном тестировании установить факт внутриутробного инфицирования плода; при проведении обследования в первые 24–48 ч после рождения лабораторно подтвердить врожденную инфекцию, вызванную ВПГ.

Диагностическое значение (специфичность и чувствительность) обнаружения ДНК ВПГ в СМЖ у больных ВИЧ-инфекцией с поражением ЦНС окончательно не установлены. Возможно, для подтверждения герпетической этиологии энцефалита необходимо определение концентрации ДНК ВПГ в СМЖ. Исследование для обнаружения ДНК ВПГ в крови малоинформативно в связи кратковременным нахождением ВПГ в сосудистом русле, следовательно, возможно получение отрицательного результата несмотря на развитие клинически выраженного заболевания.